Curva de calibración (lineal y 4PL)

Cómo se calcula

• Recta: mínimos cuadrados (ponderados si eliges 1/x o 1/x²). La concentración de una muestra = (señal − intercepto) / pendiente.
• 4PL: señal = d + (a − d) / (1 + (x/c)^b), con a = señal con concentración 0, d = señal con concentración infinita, c = punto medio y b = pendiente. Se ajusta por Levenberg-Marquardt. La concentración = c · ((a − d)/(señal − d) − 1)^1/b.
• Recuperación = concentración calculada / nominal × 100, para cada estándar con concentración mayor que cero.

Cómo leerlo

• Un r² alto no basta: mira la recuperación de cada estándar. Una desviación sistemática en los extremos indica que el modelo no calza con la curva.
• Las inmunoevaluaciones tipo ELISA suelen seguir una curva sigmoide: ahí la recta se aleja en los extremos y la 4PL es la que corresponde.
• Las muestras con señal fuera de la de los estándares extremos se extrapolan: diluye y repite en vez de informar ese valor.
• Los criterios de aceptación de la curva (por ejemplo, el rango de recuperación) los define el inserto del kit o tu procedimiento.
• La 4PL necesita al menos 5 estándares con concentraciones distintas, incluidos puntos sobre la parte baja, media y alta de la curva.

Para el control de calidad de cada corrida, mira Gráfico de Levey-Jennings.